1. 關緊取樣室內外門,并抽真空校驗;
2. 接上氣路并檢查氣路,為防止漏氣,必要時可在各接管處用密封膠粘合; 使用 (一)操作室厭氧環(huán)境形成:按使用要求放置好必要的附件和器具,并向操作室內放入二個無毒塑料袋; 通電源開照明燈,開溫控儀,調節(jié)所需溫度及安全溫度;
3. 開紫外線滅菌燈,室內進行滅菌處理,滅菌時間按具體實驗.
4. 厭氧培養(yǎng)箱應安放在溫差較小、操作方便的位置,應避免陽光直曬和遠離采暖設備,放置平穩(wěn); 2. 將混合氣瓶、氮氣瓶安放平穩(wěn),并分別裝好減壓閥(含壓力表),安置在適當位置;
5. 操作室內第一次置換(氮氣置換): A. 先用橡皮管插入操作室內進氣口,另一頭插入塑料袋; B. 接通氮氣進氣路,打開氮氣控制閥,使二只塑料袋充足氮氣,關閉閥門 1,然后扎緊袋口; C. 把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊; D. 把塑料袋內氮氣漸漸放于操作室內,至全部放出。
6. 操作室內打開粑粒除氧劑,接通除氧催化器電源進行催化除氧,一小時后開美蘭指示劑,觀察其變色情況,不變色為操作室內達到厭氧環(huán)境;
7. 操作室第三次置換(混合氣體置換): A.調換氣路打開混合氣閥進氣,充氣時取樣室先抽真空,并隨時用腳踏開關開閉排氣; B.混合氣充滿塑料袋后,關掉混合氣閥,并打開閥,使混合氣經(jīng)過流量計,調整流量計,流量為每分鐘10ml左右; C. 把塑料袋內混合氣漸漸排于操作室內; D. 通過三次換氣后,操作室內氣體含氧量已處于極微量狀態(tài)。
8. 操作室第二次置換(氮氣置換)重復一次充氮過程,取樣室先抽真空,并注意隨時用腳踏開關開閉排氣。